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抗ALV-A雞胚成纖維細胞系說明書冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　抗ALV-A雞胚成纖維細胞系說明書
種屬:DF-1/A

形態(tài):成纖維細胞樣

培養(yǎng)方法

培養(yǎng)基:MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

生長特性:貼壁生長
細胞分類：
第一種：
是凍存產品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現用現配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
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NUGC-3人細胞 Human gasic cancer cells NUGC-3 1640+10% FBS亞胺培南質量規(guī)格：>98%,BRImipenem monohydrate

IFNG Protein Human 重組人 IFN-gamma / IFNG / γ-IFN 蛋白亞胺培南（標準品）質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Imipenem monohydrate

NCI-H2087(人非小細胞) 5×106cells/瓶×2 Mo-MuLv/3T3(Mo-MuLv感染的3T3細胞)核苷酸膠體染料質量規(guī)格：BRGreen-DNA Dye,SYBR Green I

NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞系D-葡萄糖無水質量規(guī)格：>99.5%,分子生物學級D-Glucose

HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/Egypt/ 3300-NAMRU3/2008) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 咪唑質量規(guī)格：ARImidazole
CL-0456TM4(正常小鼠Sertoli細胞)5×106cells/瓶×2質量規(guī)格：>95.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)trifluoroacetamide

SIGIRR Others Human 人 SIGIRR / TIR8 人細胞裂解液 (陽性對照) TMS-咪唑(=N-三甲基硅基咪唑)(>98.0%(T))質量規(guī)格：>98.0%(T)TMS-Imidazole (=N-Trimethylsilylimidazole)

人膀胱基質成纖維細胞RNAHBdSF miRNA5 μgN,O-雙(三甲硅基)乙酰胺(>75.0%(GC))質量規(guī)格：>75.0%(GC)N,O-Bis(trimethylsilyl)acetamide

T24細胞，人膀胱移行細胞癌細胞 大鼠細胞(wistar 大鼠),CBRH7919細胞 RN-c, 大鼠皮質神經元巴氯芬(標準品)質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品Baclofen

Ishikawa(人細胞) 5×106cells/瓶×2巴洛沙星(標準品)質量規(guī)格：> 98%,水合物標準品Balofloxacin Dihydrate
GDNF Others Rat 大鼠 GDNF 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 7-乙基喜樹堿(標準品)質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品7-Ethylcamptothecin

CL-0347HCC38(人導管癌細胞)5×106cells/瓶×27-乙基喜樹堿質量規(guī)格：>98%,BR7-Ethylcamptothecin

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞 人癌細胞，MCF7細胞 PT67(小鼠逆轉錄病毒包裝細胞)(-)-Blebbistatin質量規(guī)格：>98%(-)-Blebbistatin

人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;C918奈達鉑;順糖氨鉑質量規(guī)格：>98%,BRNedaplatin

OSMR Others Human 人 OSMR / IL31RB 人細胞裂解液 (陽性對照) 5-磺基水楊酸質量規(guī)格：ARsulfosalicyclic acid
抗ALV-A雞胚成纖維細胞系說明書人侵襲性脈絡膜色素瘤細胞;MuM-2B 大鼠皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL環(huán)嗪酮（標準品）Hexazinone質量規(guī)格：分析標準品,98%

LM-8 小鼠氯吡嘧磺?。藴势罚?/span>Halosulfuron-methyl質量規(guī)格：分析標準品,99.5%

WFDC2 Others Human 人 WFDC2 / HE4 / WAP5 人細胞裂解液 (陽性對照) 噻螨酮（標準品） Hexythiazox質量規(guī)格：分析標準品,99.5%

人*成纖維細胞HSF氟吡禾靈（標準品）Haloxyfop質量規(guī)格：分析標準品

IL2RG Others Rat 大鼠 IL2RG / CD132 人細胞裂解液 (陽性對照) 吡蟲啉（標準品）Imidacloprid質量規(guī)格：分析標準品,98.5%
收到抗ALV-A雞胚成纖維細胞系說明書處理方法
產品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸浮）、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。