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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。 |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX4089 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮細胞樣,梭形、圓形 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
細胞培養(yǎng)過程:
產(chǎn)品僅用于科研冷凍保存細胞之方法:
牛胚氣管細胞形態(tài)冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
資源名稱 牛胚氣管細胞形態(tài)
種屬:EBTr (NBL-4)
類型:貼壁生長
形態(tài):CM2-1培養(yǎng)液中,貼壁,上皮細胞樣,梭形、圓形
提供形式:復蘇形式:T25培養(yǎng)瓶1瓶;或者凍存形式:2ml凍存管2支,干冰費另計。
安全等級:2
模式菌株:未知
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:90%RPMI-1640+10%FBS
傳代方法:將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細胞剛有脫落時,則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約5min取出。傳代用12mL CM2-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細胞,后可分3~6皿培養(yǎng);
生長條件:37℃,5%CO2,CM2-1培養(yǎng)液。CM2-1培養(yǎng)液:90%RPMI-1640+10%FBS。RPMI-1640:1640培養(yǎng)基,含谷氨酰胺。
存儲條件:凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞凍存步驟:
細胞培養(yǎng)步驟:
產(chǎn)品僅用于科研一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
收到牛胚氣管細胞形態(tài)處理方法
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸浮)、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。
以下是牛胚氣管細胞形態(tài)的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
ENPP2 Others Human 人 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 活性炭(植物細胞培養(yǎng)級)質(zhì)量規(guī)格:植物細胞培養(yǎng)級Activated charcoal
大鼠嗅鞘細胞完全培養(yǎng)基 100mL10X分子篩(干燥劑用)質(zhì)量規(guī)格:干燥劑用
DH82狗腎惡性癥細胞 DH82 dog kidney maligna histiocytosis cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS1酸三苯酯(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.8%(GC)Triphenyl phosphate
IFNA5 Protein Human 重組人 IFNA5 / IFNaG / Ierferon alpha-G 蛋白 (Fc 標簽)二十三烷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.5% (GC)Tricosane
NCI-H2227(人小細胞細胞) 5×106cells/瓶×2 FRhK-4(恒河猴胚腎細胞)十一烷(標準品)質(zhì)量規(guī)格:分析標準品,≥99.8%(GC)Undecane
CM-H045人肝動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL氯法齊明(標準品)質(zhì)量規(guī)格:供TCL鑒別用Clofazimine
TSPAN31 Others Human 人 TSPAN31 人細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢呋辛酯質(zhì)量規(guī)格:745~875μg/mg,USPCefuroxime axetil
人少突膠質(zhì)前體細胞-貼壁生長HOPC達比加群質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRDabigatran
CCC-ESF-1細胞,人胚胎皮膚成纖維細胞 人癌細胞,MDA-MB-415細胞 口腔角質(zhì)細胞培養(yǎng)基OKM瑞格列奈質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRRepaglinide
瘤牛皮膚細胞;BIN-S1瑞格列奈(標準品)質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRRepaglinide
PRKAR1A Others Human 人 PRKAR1A / PRKAR1 / PKR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 匹多莫德質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRPidotimod
小耳豬肺細胞;SEP-L1匹多莫德(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定Pidotimod
A-427細胞,人細胞 小鼠成纖維細胞,L929細胞 CM-R103大鼠腦平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL硫酸羥基氯喹質(zhì)量規(guī)格:>98%Hydroxychloroquine Sulfate
RM-1(小鼠細胞) 5×106cells/瓶×2乙酰唑胺質(zhì)量規(guī)格:>99%Acetazolamide
Gibco 10486025 EXPRESS FIVE SFM..昆蟲培養(yǎng)基 1000mlBMS-345541質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBMS345541
牛胚氣管細胞形態(tài)DDC Others Mouse 小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 黃楊堿/環(huán)維黃楊星D(標準品)Cyclovirobuxine質(zhì)量規(guī)格:滴定法≥99%,標準品
豹貓皮膚成纖維樣細胞;LCS5灰氈毛忍冬皂苷乙(標準品)Macranthoidin B質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
GBC-SD細胞,細胞 人二倍體細胞系,WI-38細胞 小鼠小膠質(zhì)細胞;BV2茴芹內(nèi)酯Pimpinellin質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
小鼠細胞;P3/NSI/1-Ag4-1積雪草苷(標準品)Asiaticoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標準品
AMICA1 Others Human 人 JAML / AMICA 人細胞裂解液 (陽性對照) 吉馬酮(標準品)Germacrone質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標準品