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Gibco馬血清形態(tài)冷凍保存細胞之方法：

冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ （-20 ℃30 分鐘*） → -80 ℃16~18 小時（或隔夜） → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下， 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時， 以防止冰晶過大，造成細胞大量死亡，亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中，惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟：

資源名稱　Gibco馬血清形態(tài)
種屬:Gibco馬血清

模式菌株:未知
細胞分類：
第一種：
是凍存產品，由氮直液接拿出，干冰運輸給客戶。一般不推薦這種，也較少使用這種方式，因為復蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大，一旦細胞狀態(tài)不好，很難說是細胞自身不行，還是復蘇沒操作好；另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大，也不是細胞儲存的zui好方式，快遞時間也很難控制，多種因素影響產品的質量；干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種：產品僅用于科研
是我們復蘇好細胞，QC通過后，T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶，排除復蘇造成影響，常溫運輸也對細胞影響也不大，只需加25元運費(順豐)。
質量保證：我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等，購買到貨后，由我們實驗室擴增、凍存，凍存的產品全部經(jīng)過QC檢測，100%進口來源，100%保證5代以內，活力>95%，無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程：

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080)，85%；北美胎牛血清(United States，GIBCO，貨號16000-044)，15%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%完全培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入10cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1.棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是Gibco馬血清形態(tài)的相關熱銷產品：
ERBB2 Others Mouse 小鼠 ErbB2 / HER2 / CD340 人細胞裂解液 (陽性對照) β-NADP;β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸;氧化型輔酶 II質量規(guī)格：>95%,BRβ-NADP

LCC1 人癌細胞鳥嘌呤鹽酸鹽質量規(guī)格：>99%,BRGuanine HCl

HCC1937人癌細胞 Human breast cancer cell line HCC1937 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS索非那新琥珀酸鹽質量規(guī)格：>98%,BRSolifenacin succinate

EPO Protein Mouse 重組小鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標簽)結晶紫質量規(guī)格：BSCrystal violet

小鼠胚胎成纖維細胞(MEF-mt)(5×105) Hep G2, 人細胞系 Human結晶紫(進口)質量規(guī)格：用于生化研究,進口Crystal violet
CV-1細胞，非洲綠猴腎細胞 HPAC(人*癌細胞) CM-H010人小氣道上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL2-氨基腺苷質量規(guī)格：美國進口2-Amino Adenosine

EGFL6 Protein Human 重組人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 標簽)5'-乙基酰胺基-2',3'-亞異丙基腺苷質量規(guī)格：美國進口5'-Ethylcarboxamido-2',3'-isopropylidene Adenosine

MDA-MB-468(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 腦平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)別嘌醇核苷質量規(guī)格：美國進口Allopurinol riboside

轉PYTL基因小鼠支持細胞;15P-1N-乙酰兩性霉素B質量規(guī)格：美國進口N-Acetyl Amphotericin B

人小梁網(wǎng)細胞(HTMC)(5×105)腺苷-5'-三1酸酯二鈉鹽質量規(guī)格：美國進口Adenosine 5'-triphosphate (ATP) di salt hydrate
CST6 Others Human 人 CystatinE / CST6 / CystatinM 人細胞裂解液 (陽性對照) 順丁希二酸二丁酯shēng huà shì jì容量：25克

人胚肺二倍體細胞;2BS1炳基三基硅烷 cllyltriMqthylsilcnq 1976/7/1

SRGN Others Human 人 Serglycin / SRGN 人細胞裂解液 (陽性對照) 啊奇讀速相關物質H czithroMycin Rqlctqd CoMpound H;2-(2H-Bqnzotriczol-2-yl)-p-crqsol 61069-30-4

HEC-1-B 人子宮內膜腺癌細胞L-賴酸鹽酸鹽shēng huà shì jì容量：RT，避光25克

ACHN人腎細胞腺癌細胞 ACHN human renal cell carcinoma cells MEM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBSToluidineplueO 5g/25g/50g原裝 Amresco 0672
Gibco馬血清形態(tài)EREG Others Human 人 Epiregulin / EREG 人細胞裂解液 (陽性對照) 金胺O（標準品）AURAMINE O 質量規(guī)格：檢查

Eca-109 人細胞胭脂紅（標準品）Carmine質量規(guī)格：檢查

CL-0393NCI-H209(人小細胞細胞)5×106cells/瓶×2赤蘚紅（標準品）Acid Red 51質量規(guī)格：檢查

MA, 小鼠星形膠質細胞酸性紅 73（標準品）Acid Red 73質量規(guī)格：檢查

人永生化細胞;CNLMG-B5538LC 人肝動脈平滑肌細胞完全培養(yǎng)基 100mL（標準品）Lauric acid質量規(guī)格：含量測定
收到Gibco馬血清形態(tài)處理方法
產品僅用于科研1、首先，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后，取出細胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%，可正常傳代；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至5ml；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。