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產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
保存條件 | 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS |
品牌 | 莼試 |
貨號 | CSX3347 |
用途 | 公司產(chǎn)品僅用于科研 |
組織來源 | 詳見說明書 |
細胞形態(tài) | 上皮樣 |
是否是腫瘤細胞 | 是 |
CAS編號 | |
保質(zhì)期 | 詳見說明書 |
器官來源 | 詳見說明書 |
免疫類型 | 詳見說明書 |
品系 | 詳見說明書 |
生長狀態(tài) | 貼壁生長 |
物種來源 | 詳見說明書 |
包裝規(guī)格 | 詳見說明書 |
純度 | 詳見說明書% |
是否進口 | 是 |
小鼠細胞說明書冷凍保存細胞之方法:
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4℃ 30~60 分鐘→ (-20 ℃30 分鐘*) → -80 ℃16~18 小時(或隔夜) → 液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 ℃ 至–80 ℃ 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 ℃不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80℃ 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。
細胞凍存步驟:
資源名稱 小鼠細胞說明書
種屬:GT1-1
形態(tài):上皮樣
培養(yǎng)方法
培養(yǎng)基:DMEM-H:Dulbecco'sModifiedEagle'sMedium(DMEH-214.5g/LiterGlucose)5%FBS+5%HS
傳代方法:1:3傳代;5~7天1次。
生長特性:貼壁生長
存儲條件:基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
細胞分類:
第一種:
是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因為復(fù)蘇手法對于細胞狀態(tài)影響較大,一旦細胞狀態(tài)不好,很難說是細胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細胞儲存的zui好方式,快遞時間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運輸需要額外添加400元的運費(順豐)。
第二種:
是我們復(fù)蘇好細胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運輸也對細胞影響也不大,只需加25元運費(順豐)。
質(zhì)量保證:我們的細胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實驗室擴增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,100%進口來源,100%保證5代以內(nèi),活力>95%,無細菌、真菌、支原體污染。
細胞培養(yǎng)過程:
細胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?/span>10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4.將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
以下是小鼠細胞說明書的相關(guān)熱銷產(chǎn)品:
CD70 Others Human 人 CD70 / CD27L / TNFSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) 百蕊草素I;山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷;阿福豆苷(標(biāo)準(zhǔn)品)Kaempferol-3-O-glucorhamnoside質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
人肝永生化細胞;THLE-3寶藿苷I,羊藿苷II(標(biāo)準(zhǔn)品)Baohuoside I質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠腦膜細胞(RMC)(5×105)貝母素甲(標(biāo)準(zhǔn)品)Peimine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
CM-H048人胃粘膜上皮細胞完全培養(yǎng)基100mL貝母素乙(標(biāo)準(zhǔn)品)Peiminine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥99%,標(biāo)準(zhǔn)品
小鼠神經(jīng)母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a] 小鼠卵巢顆粒細胞完全培養(yǎng)基 100mL貝母辛(標(biāo)準(zhǔn)品)Peimisine質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
兔角膜前基質(zhì)層成纖維細胞;RCFBF 癌細胞,MCF7細胞 Cl.Ly1+2-/9細胞,小鼠T細胞吡非尼酮,哌非尼酮質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BR,可用于細胞培養(yǎng)Pirfenidone
人臍內(nèi)皮細胞;HUV-EC-C吡非尼酮,哌非尼酮(標(biāo)準(zhǔn)品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品Pirfenidone
HA Others H5N1 甲型 H5N1 (A/goose/Guiyang/337/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 胞1膽堿鈉;5-胞苷二1酸單鈉鹽質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRCiticoline
CL-0460U14-GFP(小鼠子細胞)5×106cells/瓶×2硬脂酸紅霉素質(zhì)量規(guī)格:USPErythromycin stearate
AACS Others Human 人 AACS / Acetoacetyl-CoA 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 精胺質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRSpermine
615小鼠狀肺腺株;P615鋁酞菁(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Phthalocyanine Chloroaluminum
SERPING1 Others Human 人 SERPING1 人細胞裂解液 (陽性對照) 酞菁鐵(II)(升華提)(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格:>98.0%(T)Iron(II) Phthalocyanine (purified by sublimation)
人永生化細胞;CNLMG-B5538LC酞菁(>93.0%(N))質(zhì)量規(guī)格:>93.0%(N)Phthalocyanine
PNLIPRP2 Others Human 人 Galactolipase / PNLIPRP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 顏料藍15,酞菁藍B質(zhì)量規(guī)格:Pigment Blue 15
129小鼠胚胎干細胞 The 129 mouse embryonic stem cells5-羥基羅格列酮硫酸鹽質(zhì)量規(guī)格:美國進口5-Hydroxy Rosiglitazone Sulfate
小鼠細胞說明書LA795(小鼠) 5×106cells/瓶×2 V79-4(中國倉鼠肺細胞)鹽酸四環(huán)素(標(biāo)準(zhǔn)品)Tetracycline 質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品
原代心肌細胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝:5/2.5/1ml/羧芐西林鈉Carbenicillin di質(zhì)量規(guī)格:>90%,BR
BPI Others Human 人 BPI 人細胞裂解液 (陽性對照) 羧芐西林鈉(標(biāo)準(zhǔn)品)Carbenicillin di質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標(biāo)準(zhǔn)品
大鼠卵巢顆粒細胞完全培養(yǎng)基 100mL芬苯達唑;苯硫咪唑Fenbendazole質(zhì)量規(guī)格:>99%
CHO/dhFr-倉鼠卵巢細胞,二氫葉酸還原酶缺陷 CHO/dhFr- Chinese hamster ovary cells, dihydrofolate reductase deficiency IMDM培養(yǎng)基(GIBCO)+10%FBS芬苯達唑;苯硫咪唑(標(biāo)準(zhǔn)品)Fenbendazole質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品
收到小鼠細胞說明書處理方法
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。