人可溶性細(xì)胞間粘附分子1ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)原理
發(fā)表時(shí)間：2025-06-10
人可溶性細(xì)胞間粘附分子1（sICAM-1）ELISA試劑盒采用雙抗體夾心法進(jìn)行檢測(cè)，其核心原理是通過(guò)特異性抗體捕獲樣本中的目標(biāo)蛋白，再借助酶標(biāo)記的二抗與底物反應(yīng)產(chǎn)生信號(hào)，實(shí)現(xiàn)定量分析。
實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，首先將包被有抗sICAM-1單克隆抗體的微孔板與待測(cè)樣本孵育，樣本中的sICAM-1會(huì)與固相抗體結(jié)合形成免疫復(fù)合物。洗板去除未結(jié)合物質(zhì)后，加入生物素標(biāo)記的檢測(cè)抗體，該抗體與sICAM-1的另一表位結(jié)合，形成“抗體-抗原-抗體”夾心結(jié)構(gòu)。隨后，加入辣根過(guò)氧化物酶（HRP）標(biāo)記的鏈霉親和素，通過(guò)生物素-親和素的高親和力結(jié)合，進(jìn)一步放大檢測(cè)信號(hào)。
最后，加入顯色底物TMB，在HRP催化下產(chǎn)生藍(lán)色產(chǎn)物，其顏色深淺與樣本中sICAM-1濃度成正比。終止液終止反應(yīng)后，溶液變?yōu)辄S色，用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)即可計(jì)算出樣本中sICAM-1的精確濃度。
該方法靈敏度高、特異性強(qiáng)，可廣泛應(yīng)用于炎癥、腫瘤、心血管疾病等研究領(lǐng)域，為探索sICAM-1在疾病發(fā)生發(fā)展中的作用提供可靠工具。
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